Vero細胞

Vero細胞（亦稱非洲綠猴腎細胞）是一種非整倍性的非洲綠猴腎細胞系，最初由日本千葉大學的安村美博於1962年3月27日，分離自正常非洲成年綠猴的腎臟上皮細胞[1]。「vero」即「verda reno」的縮寫，其中「verda reno」在世界語中有「綠色的腎臟」的意思，而「vero」則在世界語中表示「真相」[2] 。

在綠燈下放大了100倍的Vero細胞

特徵

Vero細胞是連續的非整倍性細胞系，這意味着它的染色體數目異常，而且已知連續的細胞系可以通過許多分裂週期，不會老化，Vero細胞的干擾素分泌出現缺陷。它們與正常的哺乳動物細胞不同，在被病毒感染時不會分泌干擾素α/β[3]。然而，它們仍然具有干擾素-α/β受體（IFNAR），因此當將重組干擾素添加到其培養基中時，它們仍然可以作出反應。

Sun等合成了五種不同尺寸的草酸鈣（COM）晶體，包括50 nm、200 nm、1 μm、3 μm、10 μm，並且比較這五種尺寸的草酸鈣晶體對Vero細胞的損傷差異[4][5]。實驗結果表明，COM的尺寸和聚集程度是影響晶體細胞毒性的重要原因，而細胞對晶體的內吞方式與晶體尺寸存在密切的關係[4]。Vero細胞內吞50nm和100 nm的COM晶體主要以網格蛋白介導的途徑，內吞1 μm的COM晶體則主要以巨胞飲（macropinocytosis）的形式進行內吞作用，而Vero細胞難以內吞尺寸更大的微米晶體[6]。

2014年，有日本的研究人員確定Vero細胞的整個基因組序列[7]。Vero細胞的12號染色體具有純合的〜9-Mb缺失，導致基因組中I型干擾素基因簇和細胞週期蛋白依賴性激酶抑製劑CDKN2A和CDKN2B的丟失[7]。儘管非洲綠猴先前被歸類為草原猴（Cercopithecus aethiops），但是它們已經被歸類為綠猴屬（Chlorocebus）[8]。有基因組分析表明，Vero細胞源自雌性綠猴（Chlorocebus sabaeus）[7]。

細胞培養

Vero細胞在傳代培養時的生長狀況良好，並且發現細胞膜界線清晰和胞漿透明度較好的現象。Vero細胞的形態較為完整，細胞增殖的速度較快。Vero細胞傳代後的第三天開始形成單層，傳代細胞在第七天形成致密單層，此種致密單層在連續培養第十二天後逐漸老化，細胞在第十六天開始從培養瓶壁上脫落[9]。

Vero細胞在轉瓶後，可以在細胞培養二十四小時後出現貼壁，細胞在培養三天後可以達到相對靜止期，細胞培養的第五天可以長成單層，細胞培養到第十二天時發現其生長致密，而細胞培養至第十四天時則開始出現老化。轉瓶後的細胞生長速度比轉瓶前緩慢，然而單層細胞持續的時間比轉瓶前更持久。進行支原體檢查時未發現有支原體的生長及污染。細胞型分析結果表明Vero 細胞的核型沒有發現明顯的異常之處，而染色體數目也沒有明顯變化[9]。

研究用途

Vero細胞可以用於多種研究用途。Vero細胞在建立後不久，就被發現對多種類型的病毒高度敏感，其中包括猿猴空泡病毒40[10]、麻疹病毒[11]、風疹病毒[12][13]、節足動物攜帶性病毒[14]及腺病毒[15]等。後來被發現也容易感染細菌毒素，包括白喉毒素[16]、不耐熱腸毒素（heat-labile enterotoxins）[17]和志賀氏樣毒素[18][19]等。

Vero細胞可以篩選大腸埃希氏菌的毒素。在Vero細胞被建立後，這些毒素亦可以稱為「Vero毒素」。由於與痢疾志賀氏菌（Shigella dysenteriae）分離出的志賀氏毒素相似，因此後來被稱為志賀氏樣毒素（Shiga-like toxin）[7]。

Vero細胞又可以作為錐蟲目等真核寄生蟲的宿主細胞[7]。此外，Vero細胞被廣泛應用於病毒感染分子機制研究、疫苗及重組蛋白的生產[20][21][22]，世界衛生組織甚至認可其作為疫苗生產細胞系，建議將其作為流感疫苗生產的替代基質。目前已知Vero細胞可以協助生產狂犬病[23]及水貂犬瘟熱等疫苗[24]，而用Vero細胞培養的流感疫苗可以更好地介導人體產生對流感的免疫應答[25]。

豬流行性腹瀉病毒

Hofmann等通過在培養基中添加胰蛋白酶，證實豬流行性腹瀉病毒（PEDV）除了能夠在天然宿主的初始靶細胞上增殖外，還可以在Vero細胞中增殖。同時又發現胰蛋白酶對PEDV纖突糖蛋白的切割作用，增強病毒對Vero細胞的感染力[26]。Ye等通過構建穩定表達PEDV ORF3蛋白的Vero細胞，發現ORF3蛋白能夠促進PEDV的增殖[27]。然而有研究顯示不同的結果，例如Chen等發現orf3基因轉譯的提前終止，有利於PEDV適應Vero細胞，並且可以提高其在Vero細胞上的複製能力[28]；而Sun等對非胰蛋白酶依賴PEDV 85-7的Vero細胞的研究表明，PEDV的複製並沒有被orf3基因的突變或轉譯的提前終止顯著影響[29]。另外，Li等構建缺失orf3基因的重組PEDV，發現orf3基因缺失株和攜有全長orf3基因的重組病毒，在Vero細胞上的滴度相同，故而推測orf3基因不影響其在Vero細胞上的增殖[30]。

參考資料
  1. Yasumura Y, Kawakita M. . Nippon Rinsho. 1963, 21 (6): 1201–1219.
  2. Shimizu B. Seno K, Koyama H, Kuroki T , 编. . Tokyo: Kyoritsu Shuppan. 1993: 299–300. ISBN 978-4-320-05386-1 （日语）.
  3. Desmyter J, Melnick JL, Rawls WE. . J. Virol. October 1968, 2 (10): 955–61. PMC 375423. PMID 4302013.
  4. Sun, XY; Gan, QZ; Ouyang, JM. . Scientific reports. 2017-02-02, 7: 41949 [2020-02-21]. PMID 28150811. doi:10.1038/srep41949. （原始内容存档于2020-02-22）.
  5. Sun, XY; Ouyang, JM; Gan, QZ; Liu, AJ. . Journal of biomedical nanotechnology. 2016-11, 12 (11): 2001–14 [2020-02-21]. PMID 29364612. doi:10.1166/jbn.2016.2289. （原始内容存档于2020-02-22）.
  6. 饒晨穎; 郭達; 孫新園; 歐陽健明. . 無機化學學報. 2019, (3): 467-476.
  7. Osada N, Kohara A, Yamaji T, Hirayama N, Kasai F, Sekizuka T, Kuroda M, Hanada K. . DNA Research. 2014, 21 (6): 673–83. PMC 4263300. PMID 25267831. doi:10.1093/dnares/dsu029.
  8. Haus T, Akom E, Agwanda B, Hofreiter M, Roos C, Zinner D. . Am. J. Primatol. April 2013, 75 (4): 350–60. PMC 3613741. PMID 23307319. doi:10.1002/ajp.22113.
  9. 陳靜行; 張文傑; 鄒超傑. . 醫學美學美容. 2019, 28 (16): 26.
  10. Yasumura Y; Kawakita Y. . Nihon Risnsho 21. 1963: 1201–1215 [2020-02-22].
  11. Sasaki, K; Makino, S; Kasahara, S. . The Kitasato archives of experimental medicine. 1964-12, 37 (1): 27–42 [2020-02-22]. PMID 5833688. （原始内容存档于2020-02-22）.
  12. Rhim, JS; Schell, K. . Proceedings of the Society for Experimental Biology and Medicine. Society for Experimental Biology and Medicine (New York, N.Y.). 1967-06, 125 (2): 602–6 [2020-02-22]. PMID 4961492. doi:10.3181/00379727-125-32157. （原始内容存档于2020-02-22）.
  13. Liebhaber, H; Riordan, JT; Horstmann, DM. . Proceedings of the Society for Experimental Biology and Medicine. Society for Experimental Biology and Medicine (New York, N.Y.). 1967-06, 125 (2): 636–43 [2020-02-22]. PMID 4961494. doi:10.3181/00379727-125-32167. （原始内容存档于2020-02-22）.
  14. Simizu, B; Rhim, JS; Wiebenga, NH. . Proceedings of the Society for Experimental Biology and Medicine. Society for Experimental Biology and Medicine (New York, N.Y.). 1967-05, 125 (1): 119–23 [2020-02-22]. PMID 6027511. doi:10.3181/00379727-125-32029. （原始内容存档于2020-02-22）.
  15. Rhim, JS; Schell, K; Creasy, B; Case, W. . Proceedings of the Society for Experimental Biology and Medicine. Society for Experimental Biology and Medicine (New York, N.Y.). 1969-11, 132 (2): 670–8 [2020-02-22]. PMID 4982209. doi:10.3181/00379727-132-34285. （原始内容存档于2020-02-22）.
  16. Miyamura, K; Nishio, S; Ito, A; Murata, R; Kono, R. . Journal of biological standardization. 1974-07, 2 (3): 189–201 [2020-02-22]. PMID 4214816. doi:10.1016/0092-1157(74)90015-8. （原始内容存档于2020-02-22）.
  17. Speirs, JI; Stavric, S; Konowalchuk, J. . Infection and immunity. 1977-05, 16 (2): 617–22 [2020-02-22]. PMID 405326. （原始内容存档于2020-02-22）.
  18. Konowalchuk, J; Speirs, JI; Stavric, S. . Infection and immunity. 1977-12, 18 (3): 775–9 [2020-02-22]. PMID 338490. （原始内容存档于2020-02-22）.
  19. Remis, RS; MacDonald, KL; Riley, LW; Puhr, ND; Wells, JG; Davis, BR; Blake, PA; Cohen, ML. . Annals of internal medicine. 1984-11, 101 (5): 624–6 [2020-02-22]. PMID 6385798. doi:10.7326/0003-4819-101-5-624. （原始内容存档于2020-02-22）.
  20. Nikolay, A; Castilho, LR; Reichl, U; Genzel, Y. . Vaccine. 2018-05-24, 36 (22): 3140–3145 [2020-02-21]. PMID 28343780. doi:10.1016/j.vaccine.2017.03.018. （原始内容存档于2020-02-22）.
  21. Castrillón-Betancur, JC; Urcuqui-Inchima, S. . Memorias do Instituto Oswaldo Cruz. 2017-04, 112 (4): 281–291 [2020-02-21]. PMID 28327787. doi:10.1590/0074-02760160404. （原始内容存档于2020-02-22）.
  22. Kulkarni, PS; Sahai, A; Gunale, B; Dhere, RM. . Expert review of vaccines. 2017-04, 16 (4): 303–311 [2020-02-21]. PMID 28276304. doi:10.1080/14760584.2017.1294068. （原始内容存档于2020-02-22）.
  23. Hassanzadeh, SM; Zavareh, A; Shokrgozar, MA; Ramezani, A; Fayaz, A. . Pakistan journal of biological sciences : PJBS. 2011-04-01, 14 (7): 441–8 [2020-02-21]. PMID 21902056. doi:10.3923/pjbs.2011.441.448. （原始内容存档于2020-02-22）.
  24. 馮二凱; 易立; 羅國良; 王振軍; 郭利; 陳立志; 程世鵬; 程悅寧. . 中國獸藥雜誌. 2019, 53 (8): 15-22.
  25. Mochalova, L; Gambaryan, A; Romanova, J; Tuzikov, A; Chinarev, A; Katinger, D; Katinger, H; Egorov, A; Bovin, N. . Virology. 2003-09-01, 313 (2): 473–80 [2020-02-21]. PMID 12954214. doi:10.1016/s0042-6822(03)00377-5. （原始内容存档于2020-02-22）.
  26. Hofmann, M; Wyler, R. . Journal of clinical microbiology. 1988-11, 26 (11): 2235–9 [2020-02-21]. PMID 2853174. （原始内容存档于2020-02-22）.
  27. Ye, S; Li, Z; Chen, F; Li, W; Guo, X; Hu, H; He, Q. . Virus genes. 2015-12, 51 (3): 385–92 [2020-02-21]. PMID 26531166. doi:10.1007/s11262-015-1257-y. （原始内容存档于2020-02-22）.
  28. Chen, F; Zhu, Y; Wu, M; Ku, X; Ye, S; Li, Z; Guo, X; He, Q. . Viruses. 2015-10-23, 7 (10): 5525–38 [2020-02-21]. PMID 26512689. doi:10.3390/v7102891. （原始内容存档于2020-02-22）.
  29. Sun, M; Ma, J; Yu, Z; Pan, Z; Lu, C; Yao, H. . Veterinary research. 2017-08-30, 48 (1): 44 [2020-02-21]. PMID 28854955. doi:10.1186/s13567-017-0449-y. （原始内容存档于2020-02-22）.
  30. Li, C; Li, Z; Zou, Y; Wicht, O; van Kuppeveld, FJ; Rottier, PJ; Bosch, BJ. . PloS one. 2013, 8 (8): e69997 [2020-02-21]. PMID 23936367. doi:10.1371/journal.pone.0069997. （原始内容存档于2020-02-22）.

外部連結
维基共享资源中相关的多媒体资源：Vero細胞
This article is issued from Wikipedia. The text is licensed under Creative Commons - Attribution - Sharealike. Additional terms may apply for the media files.